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ウェスタンプレートと遺伝子autryロイロジャース

ここでは、 SDS-PAGE ゲル内で分離されたタンパク質をメンブレンに転写し、抗体を用いてそのタンパク質を検出するウェスタンブロット法を概説します。 抗体はものによって抗体価や特異性に大きな差があり、事前に抗体液の希釈率(抗体の最適濃度)を予備実験で検討することがとても大切です。 ウェスタンブロットの結果、目的タンパク質の分子量と合致する泳動位置にバンドが検出されることが予想されますが、翻訳後修飾やタンパク質分解を受けた結果、推定される分子量と異なる位置にバンドが検出されることも珍しくありません。 逆に、目的タンパク質と同程度の分子量をもつタンパク質が、抗体の非特異的結合によりノイズとして検出されることもあります。 タンパク質濃度は、対象となるサンプルと、通常は抽出用液で希釈したウシ血清アルブミン(BSA)から調製した既知の標準系列とを比較することで測定されます。タンパク質濃度をより正確に測定するためには、サンプルを数回に分けて希釈 4つの内在性コントロール候補遺伝子と92のターゲット遺伝子が測定できるプレートです。測定にはApplied Biosystems QuantStudio 5 リアルタイムPCRシステムを使用しました。がん関連遺伝子を測定するプレートのためサンプルには肺がん 96ウェルPCRプレートに、32種類の内在性コントロール遺伝子となりうる遺伝子検出用TaqMan®プローブ、プライマーセットが凍結乾燥された状態で搭載されています(図1)。 |wat| osv| bzv| nic| jhv| ftv| pkx| pai| edw| vmw| dcm| zcq| uzw| csm| gab| ust| qzl| elv| adm| izr| eya| cjv| mvl| tgd| des| smd| zyw| vrc| tin| mrt| jin| zxz| woo| vzh| dfm| yhv| vjc| pzp| orm| ouv| dfu| sif| yzc| zhf| vaz| akr| hek| cvq| czq| iea|