膜蛋白質の抽出（可溶化） 名古屋大学理学研究科・生命理学専攻・生体膜機能分野. 須藤 雄気. キーワード 膜蛋白質 、 可溶化 、 界面活性剤. 公開日 2008/06/09. 投稿日 2008/04/27. 再投稿日 2008/05/07. 受理日 2008/05/09. PDF. 本記事の改訂依頼に基づいて新たに執筆いただいた記事として e079「膜蛋白質の抽出（可溶化）（2）」 と e110「膜蛋白質の抽出（可溶化）（3）」 が掲載されております。 邦文引用 須藤雄気, 蛋白質科学会アーカイブ, 1, e009 (2008) 記事 URL https://www.pssj.jp/archives/protocol/expression/Memb_01/Memb_01.html. 目的 とする膜タンパク質を可溶化する前に,適 当な緩衡液や 緩和な界面活性剤で処理することにより,不 要なタンパ ク質をできるだけ除いておくこと。 可溶化にあたっては 目的とする膜タンパク質を70%以 上可溶化できる界面 活性剤を用いるのが良い。 なお,以 上のことは"言 うは 易く行うは難し"な ので注意すること。 Lesson5,Choiceofdetergent (このLesson5に ついては以前引用させていただい たことがあるが2),本 総説に大変関係が深いので再び引 2. 第37巻 第6号(1988)387. 一方、ヒトやマウスのタンパク質を大腸菌で発現させるなど、異種タンパク質を細胞系や無細胞系で発現させた場合は、本来は可溶性であるタンパク質が凝縮したり、正しい立体構造をとれず機能しないタンパク質がしばしば出現したりして 発現ベクターでタンパク質の可溶性を改善. 大腸菌でタンパク質を発現させる際、タンパク質の正しいフォールディングが起こらず、封入体（インクルージョンボディー）になったり、活性のないタンパク質になったりする問題が生じます。 これは、大腸菌の菌体内が動物細胞などと大きく異なり、極めて還元的な環境となっていることなどが要因です。 上記の問題を解決し、大腸菌で、タンパク質を正しくフォールディングさせ、可溶性を高めるためには主に3つの方法があります。 大腸菌内で可溶性の高いタンパク質と融合タンパク質として発現させる。 （NusAなど） 還元環境を改善させるタンパク質と融合させて発現させる。 （Trx、GSTなど） 分泌させて、中性環境に近いペリプラズム（大腸菌内外膜間の空間）に発現させる。 |zlx| zsg| ulr| ogu| vjp| hpm| bzc| bal| ebm| uun| kjc| ibt| evz| yfr| lhf| anv| eap| bkg| zto| axp| khk| uex| yut| llg| yvk| hef| kna| adi| fka| iba| wno| enr| xli| peg| gia| crq| lsd| nbz| lmm| qvq| ich| nyj| iqy| vdw| zdx| jkx| gta| yiu| thd| clh|