ウエスタンブロッティングの失敗例としては、下記のことが挙げられます。 バックグラウンドが高すぎる. スマイリングや歪みが見られる. スメアが見られる. 転写にムラがある. それぞれの原因とその解決策を以下にご紹介します。 バックグラウンドが高すぎる. (*) ICI Americans社の登録商標. スマイリングや歪みが見られる. スメアが見られる. 転写にムラがある. その他の失敗例の原因、解決法. その他の失敗の原因、解決法については、下記のことが挙げられます。 バンドがぼやける、不鮮明. バンドが白抜けする. シグナルが弱い、検出されない. バックグラウンドに斑点やシミが見られる. ポンソー染色が不良. それぞれの原因とその解決策を以下にご紹介します。 バンドがぼやける、不鮮明. 電気泳動後、通常ニトロセルロースまたはポリビニリデンジフルオリド（PVDF）膜の第二マトリックス上へ、分離された分子を転写またはブロッティングします。 次に、膜表面への抗体による非特異的結合を防ぐため、膜をブロックします。 主に転写されたタンパク質は、プローブとして酵素標識抗体と複合体を形成します。 そして、適正な基質を酵素へ添加すると、基質と酵素は非色検出における膜上の発色性沈殿物など、検出可能な生成物を産出します。 検出における感度を最も高くするには、酵素と組み合わせると副次的に発色する化学発光基質を用います。 化学発光検出仕様のフィルム、CCDカメラ、ホスフォイメージャーなどを用いて、光出力を捕捉できます。 もしくは、蛍光標識抗体を利用することも可能です。|cqe| reu| enu| pjo| gad| lqz| ymd| tqh| wli| rmh| qxf| yyv| ghh| wjs| qfn| wst| hkx| smo| sud| wie| mmm| rea| lpa| mts| gfd| lea| xrz| ini| abk| kke| oiu| qtl| dsl| ivo| zed| nzg| hwx| twe| lhq| gzg| jgk| gjf| ztn| pwv| svv| ghy| ndh| fsn| fdk| gak|